無菌室標準化規（guī）程及驗收（shōu）規範

1、無菌室應設有無菌操作間和緩衝間，無（wú）菌操作間潔淨度應達到10000級，室內溫度保持在20-24℃，濕度保持（chí）在45-60%。超淨（jìng）台潔淨度應達到100級。
2、無菌室應保持（chí）清潔，嚴禁堆放雜物，以防汙染。
3、嚴防一切滅菌器材和（hé）培養基汙染，已汙染者應停止（zhǐ）使用。
4、無菌（jun1）室應備有工作濃度的消毒液，如5％的甲酚溶液，70％的（de）酒精，0.1％的新潔爾滅溶液，等等。
5、無菌室應定期用適（shì）宜的消毒液滅菌清潔，以保證無菌室的潔淨度（dù）符合要求。
6、需要帶入無（wú）菌室使（shǐ）用的儀器，器械，平皿等一切物品，均應包紮嚴密，並應經過適宜的方法滅菌。
7、工作人員進入（rù）無（wú）菌（jun1）室前，必須用肥皂或消毒液洗手消（xiāo）毒，然後在緩衝間更換工作服，鞋，帽子，口罩和手套（或用70%的乙醇再次擦拭雙手），方可進入無菌（jun1）室進行操作。
8、無菌室使用前（qián）必須（xū）打開（kāi）無菌室的紫外燈輻（fú）照滅菌30分鍾以上（shàng），並且同時打開超淨台進行吹（chuī）風（fēng）。操作完畢（bì），應（yīng）及時清理無（wú）菌室，再用紫外燈輻照滅菌20分鍾。
9、供試品在檢查前，應保持外包裝完整，不得開啟，以防汙染（rǎn）。檢查前，用70％的酒精棉（mián）球消毒外表麵。
10、每次操作過程中（zhōng），均應做陰性對照，以檢查無（wú）菌操作的可（kě）靠性。
11、吸取菌液時，必須用吸耳球吸取，切勿直接用口接（jiē）觸吸管。
12、接種（zhǒng）針每次使用前後（hòu），必須（xū）通過火焰灼燒滅菌，待冷卻（què）後，方可接種培養物。
13、帶有菌液的吸管，試管，培養皿等器皿應（yīng）浸泡在盛有5%來蘇爾溶液的消毒桶內消毒，24小時後取出衝洗。
14、如有菌液灑在桌上或地上，應立即用5%石（shí）碳酸溶液或3％的來蘇爾傾覆在被汙染（rǎn）處至少30分鍾，再做處理。工作衣帽等受到菌液汙染時，應（yīng）立即脫去，高壓蒸汽滅菌後洗滌。
15、凡帶有活菌的物品，必須經消毒後，才能在水下（xià）衝洗，嚴禁汙染下水（shuǐ）道。
16、無菌室應每月檢查菌落數（shù）。在（zài）超淨工作台開啟的（de）狀態下，取內徑90mm的無菌培養皿若幹，無菌操作分別注入融化並（bìng）冷卻（què）至約45℃的營養（yǎng）瓊脂培養基約15ml，放至凝固（gù）後，倒置於30～35℃培養（yǎng）箱培養48小時，證明無菌後，取（qǔ）平板3～5個，分別放置工作（zuò）位置的左中右等處，開（kāi）蓋暴（bào）露30分鍾後，倒置於30～35℃培養箱培養48小時（shí），取出檢查。100級潔（jié）淨（jìng）區平板雜菌數平均不得超過1個菌落，10000級潔淨室平均不得超過3個菌落。如超過限度，應對無（wú）菌室進行*消毒，直至重複檢查合乎要求為止。