四級生（shēng）物安全實驗（yàn）室要求規範

按照BSL-4標準建造的實驗室，也（yě）稱為高度實驗室生物安全。實驗室為獨立（lì）的建築物，或在建築物內一切（qiē）其它區域相（xiàng）隔離的可控製的區域。為防止微生（shēng）物傳播和汙染環（huán）境，BSL-4實驗室必須（xū）實施（shī）特殊的設計和工藝。在此沒有提到的BSL-3要求的各條款在BSL-4中都應做到。其具體的標準微生物操（cāo）作、特殊操作、安全設備和實驗室設施要求（qiú）如下：
1、標準操作（zuò）
（1）限製進（jìn）入實（shí）驗室的人員數量（liàng）。
（2）製定（dìng）安（ān）全操作利器的規程。
（3）減少或避（bì）免氣溶膠發（fā）生。
（4）工作台麵每天至（zhì）少消毒一次，任何濺出物都要及時消毒。
（5）一切廢棄物（wù）在處理前要高壓滅菌。
（6）昆蟲和齧齒類動物控製按有關規定執行。
（7）嚴格控製菌、毒種（見前）。
2、特殊操作
（1）人員進入
隻有工作需要（yào）的（de）人員和設備運轉需要的（de）人員經過係統的生物安全培訓，並經過批準後方能進入實驗（yàn）室。負責人或監督人有責任慎重處（chù）理每一個情況，確定進入實（shí）驗室工作的人員。采用（yòng）門（mén）禁係統限製人員進入。進入人員由實驗室負責人、安（ān）全控製（zhì）員管理。人（rén）員進入前（qián）要告知他們潛在的生（shēng）物危險，教會（huì）他們使用安全裝置。工作人員要遵守實驗室進出（chū）程序（xù）。製定應對緊急事件切實可行的對策和預案。
（2）危害警告
當實驗室內有傳染性（xìng）材料或感染動物時，在所有的入（rù）口門上（shàng）展示危險標誌和普遍防禦信號，說明微生物的種類、實驗室負責人和其他責任人的（de）名單和進入此（cǐ）區域特殊的要求。
（3）負責（zé）人（rén）職責
實驗室負責人有責任保證，在BSL-4內工作之前，所（suǒ）有（yǒu）工作人員已經高度熟練掌握標準微（wēi）生物操作技術、特殊操作和設施運（yùn）轉的（de）特殊技能。這（zhè）包括實驗室負責人（rén）和具有豐富的安全微生物（wù）操作和工作經驗專家（jiā）培訓時所提供的內容和安全委（wěi）員（yuán）會的要求。
（4）免疫接種
工作人員要接（jiē）受試驗病原（yuán）體或實驗室內潛在病原微生物的免疫注射。
（a）血清學監督：對實驗室所有工作人員和其他有（yǒu）感染危險的人員采集本底血清並（bìng）保存，再根據操（cāo）作情況和實驗室功能不定期血樣采集。進行血（xuè）清學監（jiān）督。對致病微生物抗體評價方法要注意（yì）適用性。項目進行中，要保證每個階（jiē）段血清樣本的檢測，並把結果通知本人。
（b）安全手冊：製（zhì）定生物安全手冊（cè）。告知工作人員特（tè）殊的生物危險，要求他們認真閱（yuè）讀並（bìng）在實際工作當（dāng）中嚴格執行。
（c）技術培訓（xùn）：工作人員必須經過操作zui危（wēi）險病原（yuán）微生物的全麵培訓，建立普遍防禦意識，學會對暴露危害的評價方法，學習物理防護設備和設施的設計原理和特點。每年（nián）訓（xùn）練一次（cì），規程一旦修改要增加訓練（liàn）次數。由對這些（xiē）病原微生物工作受過嚴格（gé）訓練和具有豐富工作經驗的專家或安全委（wěi）員會指導、監督進行工（gōng）作。
（d）緊急通道隻有在緊急情況下才能經過氣閘門進出實驗室。實（shí）驗室內要有（yǒu）緊急通道的明顯標識。
（e）在安全櫃型實驗室（shì）中，工作人員的衣服在外更衣室脫下保存。穿上全（quán）套的實驗服裝（包括外衣（yī）、褲子、內衣或者連衣（yī）褲、鞋、手套（tào））後進入。在離（lí）開實驗室進入淋浴間之前，在（zài）內更衣室脫下實驗服裝。服裝洗前應高壓滅（miè）菌。在防護服型實驗室中，工（gōng）作（zuò）人員必須（xū）穿正壓防護服方可進入。離開（kāi）時，必須（xū）進（jìn）入消毒淋浴間消毒。
（f）實驗材料和用品要通（tōng）過雙扉高壓滅菌器、熏蒸消毒室或傳遞窗送入，每次使用前後對這些傳遞（dì）室進行適當消（xiāo）毒。
（g）對（duì）利器，包括（kuò）針頭、注射器、玻璃片、吸管（guǎn）、毛吸管和（hé）解剖刀，必須采取高度有效的防範措施。盡量不（bú）使用針頭、注射器和其它銳利的器具（jù）。隻有在必要時，如實（shí）質器官的注射、靜脈切開或從動（dòng）物體內和瓶子裏吸取液體時才（cái）能使用，盡量用塑料製品代替玻璃製品。在注射和抽取傳染性材料時，隻能使用鎖定（dìng）針頭的或一次性的注射器（針頭與注射器一（yī）體的（de））。使用過的針頭在處理之（zhī）前，不能（néng）折彎、折斷、破損，要（yào）精心操作，不要蓋上原來的針（zhēn）頭帽；放在固定方便且不會刺破的用於（yú）處理利器的容器裏。不能處理的利器，必須放在器壁堅硬的容器內，運輸到消毒區，高壓消毒滅菌。可以使用套管針管和套管針頭、無針頭注射器和其它（tā）安全器具。破損的玻璃不能用手直接（jiē）操作，必須用機械的方法清除，如刷子、簸（bò）萁、夾子和鑷子。盛汙染針頭、銳利器（qì）具、碎玻璃等，在（zài）處理前一律消毒，消毒後處理按照國家或地方的有關規（guī）定實施。
（h）從BSL-4拿出（chū）活的或原封不動的材料時，先將其放在堅固密封的一級容器內，再密封在不能破損的二級容器裏，經（jīng）過消毒劑浸泡或消毒熏蒸後通過氣閘取出。
（i）除活體或（huò）原封不動（dòng）的生物材料以外的物品，除非經（jīng）過消毒滅菌，否則不能從BSL-4拿出。不耐高熱和蒸汽的器具物品可在消毒通道或（huò）小室內（nèi）用熏蒸消毒。
（j）完成傳染性（xìng）材料工作（zuò）之後，特別（bié）是有傳染性材料溢出、濺出或汙染時，都要嚴格*地滅菌。實驗室內儀器要進行（háng）常規消毒（dú）。
（k）傳染性（xìng）材料濺出的消毒清潔工作，由適宜的專業人（rén）員進行。並將事故的（de）經過在實驗室內公示（shì）。
（l）建立報（bào）告實驗室暴露事故、雇員缺勤製度和係統，以便對與實驗室潛在危險相關的（de）疾病進行醫學監督。對該係統要建造一個病（bìng）房或觀察室，以便需要（yào）時，檢疫、隔離、治療與實驗室相關的病人。
（m）與實驗無關的物品（植物、動物和衣物）不許進入實驗室（shì）。
3、安全設備（初（chū）級防護屏障）
在設施汙染和（hé）半汙染工作區域內的一切操作都應在（zài）Ⅲ級生物安全櫃內進行。如工作人員穿著具有生命支持通風係統的正壓防護服，可在Ⅱ級生物（wù）安全櫃內進行實驗操作。
4、實驗室設施（次級防護屏（píng）障）
BSL-4實驗室（shì）有兩種類型：安全櫃型，即（jí）所有（yǒu）病原微生物的操作均（jun1）在Ⅲ級生物安全櫃內或隔離器進行；防護服型，即工作人員穿正壓防護服工（gōng）作，操作（zuò）可在Ⅱ級生物安全櫃內進行。也可以在同一設施內穿正壓防護服，並（bìng）使用Ⅲ級生物安全（quán）櫃。
（1）安全櫃型
BSL-4建築物或獨立，或在係統建築中由一個清潔（jié）區或隔牆把它與其它（tā）區域隔離開。中心實驗室（shì）（汙染區）裝有（yǒu）Ⅲ級生物安全櫃，實驗室周圍為足夠寬的隔離帶，如環形走廊（半（bàn）汙染區）。從（cóng）隔離帶進出實驗室必須通過一個緩衝間。在汙染區和半汙染區之間，安裝兩台以上生物安全型高壓蒸汽滅菌器（一（yī）次滅菌），互為備用。外（wài）更衣室（清潔區）與（yǔ）內更衣室（shì）（半汙染區）由（yóu）淋浴間（清潔區）隔開，人員進出經過淋浴間。在清潔區與半（bàn）汙（wū）染區之間設置一個通風的雙門傳遞通道，為不可通過更衣室進入實驗室的（de）實驗材料、實驗用品或儀器（qì）通過物理屏（píng）障時提供通道和消毒。在清潔區與半汙染區之（zhī）間（jiān）同樣安置一台生物安全型高壓（yā）滅菌器，用於二（èr）次消毒。每天工作開始（shǐ）之前，檢查所有物理防護（hù）參數（shù）（如壓（yā）差）。
實驗區的牆、地和天棚整體密封，便於熏蒸消毒。內表（biǎo）麵耐水和化學製劑、便於消毒。實驗區任何液體必須排放到有消毒裝置的儲液罐，經過有（yǒu）效滅菌達標排放。通風口（kǒu）和在線管道都要安裝HEPA過濾器。工作台麵不（bú）滲水，耐中等熱、有機溶（róng）劑、酸、堿和常用消毒劑的腐（fǔ）蝕（shí）。
實驗室用（yòng）具事先設計，便於安放穩妥和使用，彼此留有一定空間便於清潔衛生，桌椅表麵易於消毒。內外更衣室和實驗室進出門附近安裝非手動或自動開關的洗手池。排風經過2個串（chuàn）連的（de）HEPA過濾，送、排風過濾器安裝應（yīng）便於消毒和更換。供水（shuǐ）、供氣均安裝防止回流的裝置（zhì）加以保護。如果提供水源（消防噴槍），其開關應該是安（ān）裝在實驗室外麵走廊（láng）裏，開關自動或非手動。此係統與實驗室區域供水分配係統分開，配備防止回流裝置。實驗室進出門自動鎖（suǒ）閉。實驗室內（nèi）所有窗戶都必須是封閉窗。從Ⅲ級安全櫃和實驗室傳出的材料必須經雙扉高壓滅菌器滅菌。滅菌器與周圍物（wù）理屏障的牆之間要密封。滅菌器的門自動連鎖控製，以保證隻有（yǒu）在滅菌過程（chéng）全部完成後才能開啟外門。從Ⅲ級安全櫃或實（shí）驗室內要拿出的材料和儀器，不能用高壓滅菌（jun1）消毒的要通過液體浸泡消毒、氣（qì）體熏（xūn）蒸消毒或同等效果的消（xiāo）毒裝置進行消毒和傳遞。來自內更衣室（包括廁所）和（hé）實（shí）驗室內（nèi）的（de）洗手、地漏、高壓滅菌器的廢水以及其它廢水，在排入公（gōng）共下水之前，都要使用可靠（kào）的方法消毒（熱處理比較合適）。淋浴（yù）和清潔區一側廁（cè）所（suǒ）的廢水不需（xū）特殊處理就可排入公共下水（shuǐ）。所用廢水消毒方法必須具有物理學（xué）和生物學的監測措施和法規確認。
非循環的負壓通風係統，供、排風係統應采（cǎi）用壓力無關（guān）裝置保持（chí）動（dòng）態平衡，保（bǎo）證氣流從zui低危險區向zui高危險區的方向流（liú）動。對相鄰區域的壓差或氣（qì）流方向進行監測，能進行係統聲光報警。應（yīng）安裝一套能指示和確認實驗室壓（yā）差、適用而可視的氣（qì）壓監測裝置，其顯示部（bù）分安裝在外更（gèng）衣室的進口處。Ⅲ級（jí）生（shēng）物安全櫃與排（pái）風係統相（xiàng）連。
實驗室的供排氣都要經過HEPA過濾。為了縮短工作管道潛在的汙染，HEPA盡可能安裝在靠近工作的地方。所有HEPA每年均須檢測一次，同時在靠近HEPA的地方（fāng）應安裝零泄露氣（qì）密閥，便於過濾器安裝與消毒更換。HEPA上遊安裝預過濾器可延長其使用壽命。
安全櫃型生物安全水（shuǐ）平Ⅳ級實驗室的（de）設計和操作程序是指令性（xìng）的。實驗室必須（xū）經過檢測、鑒定和驗收（shōu）。隻有合乎設計要求和運行標準的才能啟用。實驗室的驗收或年檢應參考ISO10648標準檢測方法進行密封性測（cè）試，其檢測壓力不低於500Pa，半小時的小時泄漏率（lǜ）不超過10%，以保（bǎo）證維護結構的可靠性。實驗室每年必須檢測（cè）一次，確認合乎設計和運行參數的要（yào）求，才能繼續運行（háng）。實驗室內外（wài）應有適合的（de）通訊設施（、傳真、計算機（jī）等），進行無紙化操作。
（2）防護服（fú）型
BSL-4建築物獨立，或在係統建築中由一個清潔區或隔牆把它與建築物其它區域隔開。實驗室房（fáng）間的安排與（yǔ）安全櫃（guì）型基本相同。不同的是在進入實驗室（可用Ⅱ級生物安全櫃代替（tì）Ⅲ級生物安全櫃）之前要穿上有生命支持係統的正壓防（fáng）護服（fú）。生命支（zhī）持（chí）係（xì）統所供氣（qì）體應滿足可呼吸空氣生產標準，同時應增（zēng）加緊急排風設施及（jí）配有備用電源。進入（rù）BSL-4實驗室之（zhī）前（qián）要設置一個更衣和消毒區（設（shè）在實驗室的（de）一角或環形走廊內側）。工作人員（yuán）離開（kāi）此區之前應在消（xiāo）毒室對防護服表麵進行藥物噴淋和熏蒸（zhēng），時（shí）間不（bú）短（duǎn）於5分鍾。備用電源，在停電時應能夠保證排風、生命支持係（xì）統、警鈴（líng）、燈光、進出控製和（hé）生物（wù）安全櫃（guì）的應（yīng）急工作。所有通向實驗區、消毒淋浴室、氣閘（zhá）的空隙都要（yào）封（fēng）閉。每天實驗開始之前（qián），要完（wán）成對所有物（wù）理防護參數（如壓差等）和（hé）正壓防護（hù）服的檢測，以（yǐ）保證實驗室安全運行。在實驗區跨牆安裝雙扉高壓（yā）滅菌器，對從實驗區拿出的廢棄物進行一次消毒。高（gāo）壓滅菌器與物理防護的壁板間要密閉。
設置渡槽、熏蒸（zhēng）消毒傳（chuán）遞小室（櫃），供不能通過更衣室進入實驗區的實驗材料、用品或儀（yí）器的消毒和傳遞使用。這些設施還能用於不能高壓的材料、用品和儀器安全地取出。在清潔區與半汙染區之間同樣安置一台雙扉生物安全型高壓滅菌器，用於二次消毒。實驗區的牆、地和天棚整體密（mì）封，便於熏（xūn）蒸消毒。內表麵耐（nài）水和化學製劑、便於消毒。實驗區任何液體必須排（pái）放到有消毒裝置的儲液罐，經過有效滅（miè）菌達標排放。通風口和在線管道都要安裝HEPA過濾器。實（shí）驗區內部附屬設施（shī），如燈的固定、空氣管道、功能管道等的安排盡可能減少水平表麵麵積。工作（zuò）台（tái）麵不滲水（shuǐ），中等耐熱、抗有（yǒu）機溶劑（jì）、酸、堿和常用消毒劑的腐蝕。
實驗用具要簡單、分（fèn）體、適用、牢固（gù），不選用多孔材（cái）料。桌、櫃、儀器（qì）之（zhī）間（jiān）保持一定空間，便於清潔和消毒。實驗用椅和其它用具的（de）表麵應易於消毒。實驗區、內外更衣室的洗手池設非（fēi）手動開關。中央真空係統（tǒng）設在實驗區內，在線（xiàn）HEPA過濾器靠（kào）近每一個使用點或（huò）開關。過濾器安裝（zhuāng）便於（yú）消毒和更換。其（qí）它進入實驗區的供水、供氣由防止回流裝置（zhì）加以控製。
實驗（yàn）區的門采用門禁係統。消毒淋（lín）浴、氣（qì）閘室的內外門連鎖。來自汙染（rǎn）區內的洗手池、地漏、滅菌器和其它來源的（de）廢水必（bì）須排（pái）放到有消毒裝置的儲液罐，經過有效滅菌達標排放。來自淋浴和廁所的廢水經處理後排入下水道。所用（yòng）的廢水消毒方法的效果要（yào）有物理學和（hé）生（shēng）物學的證（zhèng）據。
全新風通風係統。供、排風係（xì）統應采用壓力（lì）無關裝置保持動態平衡，保證氣流從zui低危險區向zui高危險區（qū）的（de）流動。對相鄰區域的壓差或（huò）氣（qì）流方向進行監測，能進行係統聲光報警。應安裝一套能指示和確認（rèn）實驗（yàn）室壓（yā）差、適用而可視的氣壓監測裝（zhuāng）置，其顯示（shì）部分安裝在外更衣室的進口處。
實驗區的供氣要通過一個HEPA過濾處理，排氣要通過串（chuàn）連的2個HEPA過濾處理。空氣向高空排放，遠離進氣口。為（wéi）了縮短工作管道潛在的汙染，HEPA盡可能安（ān）裝在靠近工作的（de）地方。所有HEPA每年均須檢測一次，同時在靠（kào）近HEPA的地方（fāng）應安裝（zhuāng）零泄露氣密閥，便於過濾器安裝與消毒更換。HEPA上遊（yóu）安裝預過濾器（qì）可延長（zhǎng）其使用壽命。
防護服（fú）型生物安（ān）全Ⅳ級實驗室設計和運轉要求是指令性的。實驗室必（bì）須（xū）經過（guò）檢測、鑒定和驗收。隻有合乎設計要求和運行標準的才能啟（qǐ）用。實驗（yàn）室的驗收或年檢應參考ISO10648標準檢測方法進行密封性測（cè）試，其檢測壓力不低於（yú）500Pa，半小時內的小時泄漏率不（bú）超過10%，以保證維護結構的可（kě）靠性。實驗室（shì）每年必須檢測（cè）一次，確認合乎設計和運（yùn）行參數（shù）的要求，才能繼續運行。實驗室內外應有適合的通訊設施（、傳真、計算機等），進行無紙化操作。