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一、監（jiān）測依據
1、《中華人（rén）民共和國國家標準（醫藥工業潔淨室（區）沉降菌的測試方法）》GB/T 16294-2010。
2、《藥品（pǐn）生產質量管理規範》（2010年修訂）。
二、檢測原理
沉降菌的測試（shì）方法采用沉降法（fǎ），即通過（guò）自然沉降原（yuán）理收集在空氣中（zhōng）的（de）生物粒（lì）子於培養基平皿，經若幹時間，在適宜的條件（jiàn）下讓其（qí）繁殖到可見的菌落（luò）進行計數，以（yǐ）平板培養皿中（zhōng）的菌落數來判定潔淨（jìng）環境內的活微生物數，並以（yǐ）此來評定潔淨室（區）的潔淨度（dù）。
三、監測要求
1、測試（shì）條件
（1）溫度和相對濕度：潔淨室（區（qū））的溫度和相對濕度應與（yǔ）其生產及工藝要求（qiú）相適應（無特殊要求（qiú）時，溫度在18～26℃，相對濕度在45%～65%為宜），同時還應滿足測試儀器（qì）的使用範圍。
（2）室內壓差、送風量或風速應（yīng）符合（hé）要求。
（3）高效過濾器的泄漏測試應符合要求。
2、測試狀態
（1）沉降菌測試前，被測試潔淨室（區）的溫（wēn）度、濕度須達到規定的要求，靜壓差必須控製在規定值內。
（2）沉降菌測試前，被測試潔淨（jìng）室（區）已經過消毒。
（3）測試狀態有靜態和動態兩種，測試狀態的選擇（zé）必須符合生產的要（yào）求，並在報告（gào）中注明測試狀態。
3、測（cè）試時間
（1）靜態a：單向（xiàng）流潔淨室（區）在空氣淨化係統正常運（yùn）行10min後開始，非單向流潔淨室（區）在空氣淨化係統正常運行30min後開始（shǐ）。
（2）靜態b：單向流潔淨室（區）在生產操作人員撤離現場自（zì）淨（jìng）10min後開始；非單向流潔淨室（區）在生產操作人員撤離現場，自淨20min後開始。
（3）在動態測試時，則須記錄生產開始（shǐ）的時間（jiān）以及測試時間。
備注：靜態a指潔淨室（區（qū））在空（kōng）氣淨化係統已經安（ān）裝完畢且功能完備（bèi）的（de）情況下，生產工藝設備已安裝、潔淨室（區）內沒（méi）有生產（chǎn）人員的狀（zhuàng）態。
靜態b指（zhǐ）潔淨室（區）在生產操作全部結束，生產操作人員撤離現場並經（jīng）過20min自淨後的狀態。
四、采樣
1、最少采樣點數目的確定
根據潔（jié）淨室（區）麵（miàn）積大小和潔淨級別要求不同確（què）定最少（shǎo）采樣點數目，按國（guó）家標準要求，采樣在滿足最少（shǎo）采樣（yàng）點（diǎn）數的同時還應滿足最（zuì）少（shǎo）培養皿數（shù）。不同級別的潔淨室（區）最少采樣點數可按下（xià）表確定：
備注：表中的麵積對於單向流潔（jié）淨室指的是送風（fēng）麵積，對於非單（dān）向（xiàng）流潔淨室指的是房間麵積。
最少培養皿（mǐn）數按下（xià）表確定：
2、采樣點（diǎn）的布置
（1）工作區測試點位置離地0.8～1.5m。
（2）可在關鍵設備或關鍵工作活動範圍（wéi）處（chù）增加測試點。
（3）采樣點的布置力求（qiú）均勻，避免（miǎn）采樣點在某局部區域過於集中或稀疏。
3、測試步驟
（1）測試前，用（yòng）75%乙醇棉球或0.1%新潔爾滅溶液擦拭培養皿外表（biǎo）麵後，將培（péi）養皿放入傳遞（dì）窗內殺（shā）菌至少30min。
（2）將已製備好的培養基平皿麵朝上按采樣點布置圖由內至外逐（zhú）個放置，逐一打（dǎ）開皿蓋，把培養皿蓋朝下斜靠在培養（yǎng）皿邊緣，使培養皿表麵暴露在空氣中1h以上，但（dàn）不（bú）大於4h，再講培養皿（mǐn）蓋好後倒置。
（3）靜態測試時（shí），培養皿（mǐn）暴露時間為30min以上；動態測試時，單個沉降碟的暴露時間可（kě）以少於4h，同一位置可使用多個沉（chén）降碟連續進行監測，並積累計數，直至監測時間累（lèi）計達到4h。
采樣注意事項：
（1）測試人員必須穿（chuān）戴符合環境潔淨度級別的工作服。
（2）靜態測試時，室內（nèi）測試人（rén）員不得多於2人。
（3）對於單向流（liú）潔淨室（區）或送風口，采樣器（qì）采樣（yàng）口朝向應正對氣流方向；對於（yú）非單向流（liú）潔淨室（區），采樣口向上。
（4）布置采樣（yàng）點時，至（zhì）少應盡量避開（kāi）塵粒（lì）較集中（zhōng）的回風口。
（5）采樣時，測（cè）試人員應站在采樣口的下風側，並盡（jìn）量少走動。
（6）應采取一切（qiē）措施防止采樣過程的汙染（rǎn）和其它可能對樣本的（de）汙染。
五、培養
（1）全部（bù）采樣結束後，將培養皿倒置於恒溫培養箱（xiāng）中培養，注意觀察菌（jun1）落生長情（qíng）況。
（2）采用大豆酪蛋白瓊脂培養基配製的培養皿經采樣（yàng）後，在30～35℃培養箱中培養，時間不少於2天；采用沙氏培養基配製的培養基經采（cǎi）樣後，在20～25℃培養箱中培養，時間不少於5天。
（3）每批培養基應有對照試驗，檢驗（yàn）培養基本身是否汙染。可每批選定3隻培養皿作對照培（péi）養。
六、菌落計數
（1）用肉眼對培（péi）養皿上所有的（de）菌落直接計數、標（biāo）記或在菌落計數器上點計，然後用（yòng）5～10倍（bèi）放大鏡檢查有無遺漏。
（2）若培（péi）養皿（mǐn）上有2個或2個以上的菌落重疊，可分辨（biàn）時仍以2個或2個以上菌落計數（shù），不能分辨時，以1個菌落計數。
七、計（jì）算結果（guǒ）
用計數方法得出各個（gè）培養皿的菌落數之（zhī）和（hé），每個檢測點的沉降菌（jun1）平均菌落數用（yòng）下式計算：
式中，
為平均菌落數
M1為1號培養皿菌落數
M2為2號培養皿菌落數
Mn為n號培養皿菌落數
n為培養皿總（zǒng）數
八、結果與判定
每個測點的沉降菌平均菌落數必須（xū）低於所選定評定標準中的界限。在（zài）靜態測試時，若某測點的沉降菌平均菌落數超過評定標準，則應重新采樣兩次，兩次測試結果均合格才能判為符合。不同級別潔淨室（區）沉降菌（jun1）技術指標見下表所示：
九、記（jì）錄
潔淨室（區）沉降菌的（de）監測應填寫記錄，監測報告應包含以下內容：
（1）測試者的名稱和地址，測試日期。
（2）測（cè）試依據（jù）。
（3）被測潔淨室（區）的平麵布置（zhì）。
（4）有關（guān）測試（shì）儀器及其測試方法的描（miáo）述。
（5）測試結果，包括所有統計計算資料（liào）。
當前位置：